[醫療保健] 霍亂的病原菌檢查

霍亂的病原菌檢查

1.常規鏡檢　可見粘液和少許紅、白細胞。

2.涂片染色　取糞便或早期培養物涂片作革蘭染色鏡檢，可見革蘭陰性稍彎曲的弧菌。

3.懸滴檢查　將新鮮糞便作懸滴或暗視野顯微鏡檢，可見運動活潑呈穿梭狀的弧菌。

4.制動試驗　取急性期病人的水樣糞便或鹼性腖水增菌培養6小時左右的表層生長物，先作暗視野顯微鏡檢，觀察動力。如有穿梭樣運動物時，則加入01群多價血清一滴，若是01群霍亂弧菌，由於抗原抗體作用，則凝集成塊，弧菌運動即停止。如加01群血清後，不能制止運動，應再用0139血清重作試驗。

5.增菌培養　所有懷疑霍亂患者糞便，除作顯微鏡檢外，均應作增菌培養。糞便留取應在使用抗菌藥物之前，且應盡快送到實驗室作培養。增菌培養基一般用pH8.4的鹼性蛋白腖水，36～37℃培養6～8小時後表面能形成菌膜。此時應進一步作分離培養，並進行動力觀察和制動試驗，這將有助於提高檢出率和早期診斷。

6.分離培養　常用慶大黴素瓊脂平皿或鹼性瓊脂平板。前者為強選擇性培養基，36～37℃培養8～10小時霍亂弧菌即可長成小菌落。後者則需培養10～20小時。選擇可疑或典型菌落，應用霍亂弧菌「0」抗原的抗血清作玻片凝集試驗，若陽性即可出報告。近年來國外亦有應用霍亂毒素基因的DNA探針，作菌落雜交，可迅速鑑定出產毒01群霍亂弧菌。

7.PCR檢測　新近國外應用PCR技術來快速診斷霍亂。其中通過識別PCR產物中的霍亂弧菌毒素基因亞單位CtxA和毒素協同菌毛基因（TcpA）來區別霍亂菌株和非霍亂弧菌。然後根據TcpA基因的不同DNA序列來區別古典生物型和埃爾托生物型霍亂弧菌。4小時內可獲結果，據稱能檢出每ml鹼性蛋白腖水中10條以下霍亂弧菌。

8.鑑別試驗　古典生物型、埃爾托生物型和0139型霍亂弧菌的鑑別。