耀西︰
加入方法︰遊戲初期便可使用。
角色說明︰這是耀西首次以單獨可操縱的角色登陸正統馬力奧作品，它的特殊能力是吐火，一些藏在冰塊中的星星和金幣只有靠這招才能獲得。另外長長的舌頭能吞下敵人和金幣，吞下敵人不吐出來的話可以生下個蛋，扔出去后能攻擊敵人，有跟蹤連鎖的效果。跳起來后按住B 有一段滯空時間。不過它的缺點是跑地較慢，跳地較低，筆者只是在初期使用了一會兒，獲得其他人物后就很少有出場機會了~~
所有兔子取得地點︰城堡外面有5只，地下室有1只，放完水后城堡外的護城河道上有1只（放水在地下室兩根柱子那，用坐把兩根柱子坐下去后即可放水。
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馬利奧︰
加入方法︰收集到8顆星星，來到進陽光馬利奧關的那間屋子打開那扇需要8顆星星的門，進入馬力奧畫像關，解決B O S S 后就能獲得開啟換馬利奧門的鑰匙。
角色說明︰作為主人公竟然無法在初期使用實數意外，人物能力還是沒變，屬于平均形的，不過根據我觀察，馬利奧是所有角色中跑地最快的，雖然跳地沒路易高，總得來說用起來還是很順手的。其特殊能力是變成胖子馬利奧，能漂浮在空中，很多高處的平台都要靠這招才能到達，另外他還能透過牆壁進行三角跳，這招可是非常實用的。最後要說一下最終庫巴關只有用馬利奧才能順利進入，用其他角色只有無止境的台階。
所有兔子取得地點︰城堡外面有1只，海底關的房間內有1只，地下室裡有2只，放完水后城堡外的護城河道上有1只，二樓上有1只，在瓦裡奧畫像的房間內有1只。
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路易︰
加入方法︰在鬼屋關的閣樓上有個路易的畫像，進入后是個迷宮，將你D S 的音量開大點吧，透過環繞音效能分辨出聲音是從哪扇門裡傳出來的，贊一個﹗裡面有個幽靈王，戰勝后獲得開啟換路易門的鑰匙。
角色說明︰進入3D 時代后路易就只在鬼屋大冒險中露了次臉，果不其然，這次獲得他的地點就是在鬼屋-_-b 。他的特殊能力是透明，主要用處就是來獲得一些關在籠子中的星星。此外路易的特點是跳地最高，而且在空中有滯空時間。他最好用的一招就是后空翻了（按住R 再按A ），雖然這招其他人也會，但他的特色是跳起來后透過在空中的旋轉進行漂浮，透過這招能移動到一些看似很難達到的地點，大大易化了一些星星和紅幣的入手難度。筆者60%的星星都是靠路易獲得的，強烈推薦﹗
所有兔子取得地點︰炸彈關房間有1只，馬利奧畫像房間有1只，城堡庭院裡有1只（在門上面），放水的兩根柱子那有1只，二樓上有1只，城堡外有1只，收集150星后用炮轟到城堡頂上有1只（嚴重B S 這個設定﹗）。
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瓦裡奧︰
加入方法︰到達城堡二樓，來到一個有面大鏡子的房間，使用路易進去會出現花，利用透明穿過鏡子進入瓦裡奧畫像，解決B O S S 后獲得開啟換瓦裡奧門的鑰匙。
角色說明︰瓦裡奧大人憑借最近的人氣閃亮登陸馬力奧64D S 。他的特殊能力是變成金屬人，無敵+在水中不會漂浮，透過這個能獲得一些在水中的星星和紅幣。瓦裡奧的特點是力量最大，所有角色中只有他能打破黑色的磚塊，不少星星和紅幣都要透過這個才能獲得，另外那些木樁別人要坐三次才能坐下去，而他只要坐一次便能搞定。不過此人的致命弱點是移動速度和跳躍高度是所有角色中最低的，用起來極度不順手，基本上只有到要獲得一些透過他的特殊能力才能得到的星星時才會選他出場，平時都是封印狀態……
有兔子取得地點︰地下室有1只，空中堡壘關房間裡有1只，二樓另外扇門裡有1只，鐘樓上有2只，城堡外有1只，城堡庭院裡有1只
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150星星收集
第1關~~炸彈關︰
1︰爬上山頂，干掉炸彈王后獲得（吞下小炸彈再吐向炸彈王）
2︰得到M a r i o 帽子變身成M a r i o ，然後再與一開始的那只烏龜對話后賽跑，搶先沖到山頂后獲得。（用大砲作弊不算數）
3︰變身成M a r i o 爬上山頂解決炸彈王。（饒到他背后舉起摔出去）
4︰收集5顆銀星（地圖上有顯示）
5︰在某處有一只鐵狗，用大屁坐坐栓鏈子的木樁3次
6︰收集8枚紅幣（與其中一個粉紅的炸彈人對話能開啟大砲，另外一個能查看紅幣位置）
7︰用大砲轟到空中平台上，再用炮對準空中一圈圈金幣中間的5個金幣，全部獲得后出現星星。
8︰收集100枚金幣
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第2關~~空中堡壘︰
1︰在關卡高處有一個石板王，引誘他壓下去后坐它背3次解決
2︰在石板王那出現一個塔樓，爬上去后獲得
3︰用炮瞄準旗稈子下面一點，滑下杆子后獲得
4︰在一開始那個地方有棵樹，爬上去會出現一只貓頭鷹，抓住它，看準時機松手掉到鐵籠子中。
5︰收集8枚紅幣
6︰進入炮台后向右瞄準，會看到兩個突出來的牆壁，撞掉牆角后出現星星
7︰在關卡底層有磚塊，其中一個打破后有機關，按下后出現星星，在規定時間內到達后獲得。
8︰收集100枚金幣
第3關~~海底關︰
1︰在海底沉船處有一條大鰻魚，將它引出來后進入，在寶箱中得到氣泡，一直往上跳舊能得到星星。
2︰大鰻魚尾巴上有一顆星星
3︰在關卡最遠的海底深處有4個寶箱，按照裡、左、右、外的順序調查后和獲得
4︰乘炮台，瞄準3根柱子頂部，從柱子上跳到平台上得
5︰收集8枚紅幣（有一個要變成胖子馬力奧飄過去獲得）
6︰在關卡深處踩下機關，籠子裡會出現星星，利用路易能隱身過去獲得
7︰收集100枚金幣
8︰利用金屬瓦力奧得到海底的那顆星
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第4關~~雪山關︰
1︰關卡一開始有個屋子，從煙囪下去，透過滑道后撞磚塊獲得（滑道中有近道）
2︰還是在滑道那，跟大企鵝比賽，勝利后獲得
3︰在關卡一開始的屋子上有個小企鵝將它帶到山下的企鵝媽媽那之后獲得
4︰收集8枚紅幣，其中兩塊在冰塊中的要用耀西吞下火后對著冰噴火
5︰在一開始那有個學球，對話后會往下滾，與山下的雪球頭組合成雪人后獲得
6︰乘炮台對準下面一個平台，利用各種跳躍技巧來到上面，過冰橋后獲得
7︰收集100枚金幣
8︰在雪山底有塊地方有層冰，用瓦力奧能坐開，然後乘升降梯在途中踩機關，出現星星后抓緊回去獲得。
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第5關~~鬼屋︰（在城堡庭院，解決那只大鬼后會掉出個籠子，進入既是鬼屋關）
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1︰進入屋子，干掉五只小鬼，然後會出現個大鬼，解決之獲得。（其中有間房間有個羞澀的鬼畫像，
背對著它，小鬼會從裡面鑽出來）
2︰進入屋子，進正面右邊的門，從樓上跳下去，來到有6個鬼畫像的轉盤那，干掉小鬼再解決大鬼后獲得。
3︰進2樓左邊第二扇門，在書架盡頭按照中、右、左的順序按機關，進入暗門后獲得。
4︰進2樓右邊的門，在紅色磚塊那能跳到閣樓上，透過閣樓來到屋頂，解決大鬼后獲得。
P S :在閣樓上有個路易的畫像，進入后是個迷宮，將你D S 的音量開大點吧，
透過環繞音效能分辨出聲音是從哪扇門裡傳出來的，贊一個﹗裡面有個幽靈王，戰勝后得到要是，
以後就能直接換路易使用了。
5︰收集8枚紅幣。（有一個在棺材下面）
6︰在閣樓，利用路易隱形能力進入畫像，消滅大眼球后獲得。（消滅眼球方法︰先引它注意，然後繞圈跑）
7︰收集100妹金幣。
8︰在轉盤那有塊黑磚塊，用瓦力奧打碎后下面是機關，然後變身成馬力奧就來得及得到星星了。
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第6關~~水底洞穴︰
1︰一開始走左邊的路口，透過巨石陣乘升降梯來到地底湖，
裡面有只戴著瓦力奧帽子的恐龍，爬到它背上坐一下它就會底下頭，得到帽子變身成瓦力奧，
打碎大石頭后獲得。
2︰變身成瓦力奧，來到地底湖，變成金屬瓦力奧后向前狂奔踩機關，
鐵絲網就會打開，進入后跳過障礙獲得。（進門后撞下敵人變會馬力奧，這樣就能抓住牆壁了）
3︰來到一處有污水的地方，在一處跳上去進門，然後跳到鐵絲網上移動到星星處獲得。
（建議使用瓦力奧，變成鐵人后就不怕污水了）
4︰在上面的污水處那，進另外扇門，做升降梯上去后獲得。
5︰收集8枚紅幣
6︰在收集紅幣的那個地方有塊黑色的磚塊，用瓦力奧打碎后出現機關，踩下出現星星。
7︰在某處有大石頭不斷的滾下來，其中一個裡面是星星，用瓦力奧打碎后獲得。
8︰收集100枚金幣
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第7關~~火山關︰
1︰把鐵球王推下岩漿后獲得。
2︰在另外一個平台上把3個小鐵球和一個鐵球王推下去后獲得。
3︰收集8妹紅幣。
4︰在鐵籠那有顆星星，乘浮游籠到那，利用滾木過去后獲得。
5︰跳入火山口，一路向上登后獲得。
6︰跳入火山口，乘浮板跳上爬杆來到頂部獲得。
7︰收集5顆銀星星
8︰收集100妹金幣
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第8關~~沙漠關︰（在地下室一處死路有面牆能進入）
1︰走到柱子上（可以走上去），撞下抓著星的鳥后獲得。
2︰來到金字塔頂部后獲得。
3︰進入金字塔內部，柱子上有個洞，打碎磚塊滑下去，戰勝B O S S 后獲得。（打手心眼睛）
4︰進入金字塔內部，爬到頂部后獲得。
5︰收集8枚紅幣。（空中的利用羽毛）
6︰打破黑磚塊（鐵方塊那），踩下機關后獲得。
7︰進入金字塔內，收集5顆銀星后獲得。
8︰收集100枚金幣
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第9關~~庫巴潛艇︰
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1︰透過海底通道，踩下機關后上潛艇獲得。
2︰在一開始的海底，打開3個寶箱后獲得
3︰在一開始的海底，有條尾巴處會冒一圈圈泡的魚，連續鑽過5個圈后獲得。
4︰透過海底通道，利用路易的透明能力透過關星星的籠子后獲得
5︰收集8枚紅幣
6︰收集100枚金幣
7︰用瓦力奧打碎一開始岸邊的黑磚塊，會出現機關，踩下后乘龜殼滑板到對岸獲得。
8︰透過海底通道，底下有個吐圈的地方，連續鑽過5個出現星星，用金屬瓦力奧過來獲得。
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P S ︰到達城堡2樓，來到一個有面大鏡子的房間，使用路易進去會出現花，
利用透明穿過鏡子進入瓦力奧畫像，解決B O S S 后獲得鑰匙，這樣就能使用瓦力奧了。
第10關~~雪人山︰
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1︰來到山頂后獲得。
2︰推冰面上的B O S S 下去后獲得。
3︰用耀西吐火能力融化冰塊后獲得。
4︰來到星星處，利用路易后空翻到達，頂黃色磚塊。
5︰收集5顆銀星，其中一個在冰層下面的要乘龜殼滑板過去得到（龜殼滑板就在上面那顆星邊上的黃色磚塊）
6︰到山頂過冰橋，利用路易后空翻飄到下面雪洞那，爬進去后透過透明獲得。
7︰爬進雪洞后收集8枚紅幣。
8︰收集100枚金幣。
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第11關~~水中城市︰
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1︰降一檔水位，來到星星處乘浮塊到達。
2︰跳到最高處獲得
3︰推兩個木箱，裝3塊黃色磚塊后獲得。
4︰水位降到最底，來到關著星星的籠子上，踩一下板然後跳下去，籠子底部有個洞，
鑽過去后再撐浮板上去，動作要快。
5︰收集8枚紅幣，用炮台轟到對角鐵絲網裡，游過通道來到另一面，將水位降到最低，有7枚藏在紅磚中。
6︰來到另一面降低水位，利用路易透明鑽過鐵網，跳上后獲得。
7︰收集5顆銀星，最後的星星處用胖子馬力奧飄過去。
8︰收集100枚金幣。
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第12關~~香菇山
1︰一開始利用路易的后空翻來到蘑菇上獲得
2︰爬到最上面撞黃磚塊獲得
3︰到最上面抓猴子
4︰收集8枚紅幣
5︰在一處有面雲的敵人那有面牆能進入，透過滑道后獲得
6︰空中收集5個金幣圈中間的金幣，爬上開始樹會出現貓頭鷹
7︰在瀑布中有個黑磚塊，用瓦力奧后空翻到達。
8︰收集100枚金幣
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第13關~~大人國，小人國
1︰進大人國，進入水管，坐右上角的木樁出現蘑菇，變大后消滅所有食人花后獲得。
2︰進大人國，爬到高處撞黃色磚塊后獲得。
3︰進大人國，有只鳥抓著個星星，踩下機關后來到孤島平台上，等鳥飛過來后跳起獲得。
4︰進大人國，與烏龜賽跑
5︰進大人國，來到山頂坐一下讓水流走，會發現有個小洞，進入水管變小進入洞，戰勝B O S S 后獲得。（坐B O S S 的頭）
6︰進小人國，來到與烏龜賽跑的那個地方，用路易跳到對面進入洞，收集8枚紅幣。
7︰在8紅幣那踩下機關后獲得。
8︰收集100枚金幣。
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第14關~~時鐘關︰
※在1點左右進入所有零件會停止運作
1︰用瓦力奧打碎鐵絲網那的黑磚后獲得。
2︰踩下機關后獲得。
3︰往上爬，透過指針獲得。
4︰利用路易透明能力進入籠子獲得。
5︰爬到最頂部后獲得。
6︰收集8枚紅金幣。
7︰收集5顆銀星。
8︰收集100枚金幣。
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第15關~~彩虹關︰
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1︰乘飛毯來到船上，利用金屬瓦力奧獲得。
2︰乘飛毯來到城堡頂部獲得。
3︰收集8枚紅幣。
4︰來到星星處，利用路易后空翻輕鬆到達。
5︰來到星星處，踩下機關后跳上去獲得。
6︰到城堡那，踩下機關后用胖子馬力奧飄上去后獲得
7︰利用船上的炮台轟到星星處的杆子上，頂黃磚后獲得。（讓炮台出現的粉色炸彈在8紅幣那，要用馬力奧的抓牆跳上去后才能遇到）
8︰收集100枚金幣。
